1️⃣ 细胞浓度过高会导致问题！尽管转化效率高是好的，但细胞太过拥挤就好像春运的地铁，细胞们贴得紧紧的，甚至窒息。出色的感受态、过多的质粒以及过长的热激时间都会让细胞数量达到极限。

2️⃣ 涂布技巧很关键！如果涂布棒未彻底灭菌或施加力量过大，菌液会被“抹匀”成菌泥，还可能混入杂菌导致污染。

3️⃣ 培养基品质不佳！琼脂不足会导致培养基软塌塌，细菌在其中游动会变得糊状；营养失衡也会导致细菌生长失控。

4️⃣ 文化环境竞争激烈！温度每升高1℃，细菌代谢就会加剧；培养时间过长，细菌会在培养基上叠在一起。

✨【3步急救法，瞬间让样本脱颖而出】✨

**Step 1：稀释！稀释！稀释！**重要的事情要说三遍！取100μL细菌液和900μL无菌生理盐水，首先进行10倍稀释试验。如果仍然稠密，则继续稀释100倍、1000倍，直到细菌形成如满天星般分散✨。

⚠️小提示：针对高转化效率（如电转或超感受态），可直接从1000倍开始！使用酒精灯将涂布棒加热至红色→冷却10秒后，以“Z”字形轻柔涂布，犹如给蛋糕涂奶油！如果面积不够，直接更换大培养皿，让细胞享受“尊龙凯时”的豪华空间！⚠️小提示：涂布后静置10分钟再放入培养箱，这样可以减少细菌液的流动！琼脂的称量要精确到0.1g，灭菌后摇匀以防分层。培养箱的温度需用温度计实测（不要仅依赖显示屏！），培养12-18小时内需频繁观察，避免细菌过度生长。

**场景1：细菌落太密，但是不想稀释？**可直接用牙签蘸取细菌液，在新培养板上划“之”字形线，实现单个细菌落的获取✅。

**场景2：赶时间？**将稀释后的细菌液滴在培养板边缘，细菌会自然扩散形成“菌环”，拍出的照片效果绝美。